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2013
12-03

性病检查方法

性病检查

(一)淋球菌检查

1.方法

(1)标本采集:用含无菌生理盐水的藻酸钙棉拭子,伸入男性尿道2~4cm,轻轻转动取出分泌物;女性先用无菌的脱脂棉擦去阴道内粘液,用无菌的藻酸钙脱脂棉拭子插入宫颈内1~2cm处旋转取出分泌物;患结膜炎的新生儿取结膜分泌物;全身性淋病时可取关节穿刺液;前列腺炎患者经按摩取前列腺液。

(2)直接涂片:主要用于急性感染患者。涂片2张,自然干燥、加热固定后作革兰染色,油镜下检查。

(3)细菌培养:标本立即接种于血琼脂或巧克力琼脂平板上,置于含5%~10%的CO2孵箱,37℃孵育24~48小时后观察结果。挑选可疑菌落作涂片染色镜检,也可用氧化酶试验或糖发酵试验进一步证实。

2.结果  涂片染色镜检可见大量多形核细胞,细胞内外可找到成双排列、呈肾形的革兰阴性双球菌。在培养皿上可形成圆形、稍凸、湿润、光滑、透明到灰白色的菌落,直径为0.5~1.0mm。生化反应符合淋球菌特性。

3.临床意义  直接涂片镜检阳性者可初步诊断,但阴性不能排除诊断;培养阳性可确诊。

4.注意事项  ①取材时拭子伸入尿道或宫颈口内的深度要足够;②男患者最好在清晨首次排尿或排尿后数小时采集标本进行培养;③涂片时动作宜轻柔,防止细胞破裂变形,涂片的厚薄与固定及革兰染色时间要合适。

(二)衣原体检查

1.细胞培养法  将每份标本接种于3个培养瓶(为McCoy单层细胞管)中,置37℃吸附2小时后,用维持液洗涤2~3次,最后加生长液,37℃培养3~4天,取出盖玻片,经吉姆萨染色或直接荧光染色后镜检。阳性标本碘染色包涵体呈棕黑色,吉姆萨染色呈红色。有尿道炎症状,再加上衣原体分离培养阳性者可确诊。

2.衣原体抗原检测法(clearview chlamydia,简称C-C快速法)  用商品试剂盒检测,方便、简单、快速,但稳定性略差。按说明书操作,质控窗和结果窗均显示一条蓝带为阳性结果,阴性为结果窗无变化。阳性结果结合临床可确定沙眼衣原体感染,阴性时不能完全排除,可用细胞培养法确定。

3.免疫荧光法  采集标本同淋球菌检查。将标本涂于玻片凹孔或圆圈中,干燥处理后加荧光素标记的抗沙眼衣原体单克隆抗体试剂,反应、封固后置显微镜下检查。阳性标本在高倍镜下可见上皮细胞内的原体颗粒,为单一、针尖大小、明亮的绿色荧光,在油镜下为荧光均匀、边缘光滑的圆盘样结构,也可见网状体等其他形态的衣原体颗粒。

(三)支原体检查

采集标本同淋球菌检查,也可用10ml中段尿离心(2000r/min,10min),取沉渣接种于液体培养基。置5%~10%CO2环境中,37℃培养24~72小时,每日观察颜色变化。如由黄色变为粉红色,可能有解脲支原体生长。取0.2ml培养物接种到固体培养基上,培养48小时后观察,有典型“油煎蛋”状菌落者为阳性,可诊断支原体感染。

(四)梅毒螺旋体检查

1.梅毒螺旋体直接检查  可取病灶组织渗出物、淋巴结穿刺液或组织研磨液,用暗视野显微镜检查,也可经镀银染色、吉姆萨染色或墨汁负染色后用普通光学显微镜检查,或用直接免疫荧光检查。

梅毒螺旋体菌体细长,两端尖直,在暗视野显微镜下折光性强,沿纵轴旋转伴轻度前后运动(图6-5)。镀银染色法示螺旋体呈棕黑色,吉姆萨染色法螺旋体呈桃红色,直接免疫荧光检查螺旋体呈绿色荧光。镜检阳性结合临床表现、性接触史可确诊。

2.快速血浆反应素环状卡片试验(rapid plasma reagin test,RPR)

(1)原理:为非梅毒螺旋体抗原血清试验。人体感染梅毒螺旋体一定时间后,血清中产生一定数量的心磷脂抗体,可用免疫学方法检测,作为梅毒的诊断筛选试验。

(2)操作方法:①卡片定性试验:取50μl待检血清加入卡片的圆圈内并涂匀,用专用滴管加入摇匀的抗原1滴,将卡片旋转8分钟后立即观察结果,出现黑色凝聚颗粒和絮片为阳性;②卡片定量试验:用等量盐水在小试管内作6个稀释度,即1:1、1:2、1:4、1:8、1:16、1:32,每个稀释度取50μl血清加入玻片圆圈中,按定性法测定。

类似方法还有性病研究实验室试验(venersal disease research laboratory test,VDRL)、不加热血清反应素试验(unheated serum reagin test,USR)等。

(3)临床意义:本试验敏感性高而特异性低。结果为阳性时,临床表现符合梅毒,可初步诊断。定量试验是观察疗效、判断复发及再感染的手段。假阴性常见于一期梅毒硬下疳出现后的2~3周内、感染梅毒立即治疗、晚期梅毒或二期梅毒的“前带现象”。假阳性常见于自身免疫性疾病、麻风、海洛因成瘾者、少数孕妇及老人。

3.梅毒螺旋体颗粒凝集试验(treponema pallidum particle agglutination test,TPPA)

(1)原理:为梅毒螺旋体抗原血清试验。将从感染家兔睾丸中提取的梅毒螺旋体纯化,并以超声粉碎后作为抗原,以明胶颗粒为载体。

(2)临床意义:阳性结果可明确诊断。类似方法有梅毒螺旋体血凝试验(treponema pallidum particle hemagglutination assay,TPHA)、荧光螺旋体抗体吸收试验(fluoresent treponemal antidody-absorption test,FTA-ABS),后者特异性更高,因抗原制备复杂,已很少采用。梅毒螺旋体抗原血清试验常呈持久阳性,不可用于观察、判断疗效。

(五)杜克雷嗜血杆菌检查

1.直接涂片  在开放的溃疡中不易查到细菌,所以最好从淋巴结潜行穿刺取材,一次推涂成片,以保持细菌的特征性排列方式。革兰染色可见呈鱼群状排列的杜克雷嗜血杆菌,阳性即可作出初步诊断,但容易出现假阴性或假阳性,特异性和敏感性可能都低于50%。

2.细菌培养  用含血清和低浓度万古霉素的选择培养基培养24~48小时后观察,菌落直径1~2mm,色灰黄、凸起、粗糙并能在培养基上推动,取菌落镜检或做生化反应可确诊,还可做药敏试验。

3.其他方法  单克隆抗体进行免疫荧光快速检测的阳性率可达93%;DNA探针检测的特异性和敏感性均较高。

(六)醋酸白试验

人类乳头瘤病毒感染的上皮细胞与正常细胞产生的角蛋白不同,能被冰醋酸致白。以棉签清除局部分泌物后,蘸5%冰醋酸涂在皮损及周围正常皮肤黏膜,2~5分钟后皮损变为白色、周围正常组织不变色为阳性。

(七)毛滴虫检查

在阴道后穹隆、子宫颈或阴道壁上取分泌物混于温生理盐水中,立即在低倍镜下镜检,如有滴虫时可见其呈波状移动。男性可取尿道分泌物、前列腺液或尿液沉渣检查。

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最后编辑:
作者:皮肤科医生
这个作者貌似有点懒,什么都没有留下。